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      緩沖液通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對(duì)所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時(shí)減緩pH的改變。以生物實(shí)驗(yàn)中較=較常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對(duì)，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強(qiáng)的緩沖能力。
　　緩沖液的選擇與計(jì)算：
　　為了保證緩沖液有足夠強(qiáng)的緩沖能力，在配制緩沖液時(shí)，需要做到：
　　1）為使共軛酸堿對(duì)的濃度比接近于1，應(yīng)根據(jù)所需要維持的pH范圍選擇合適的緩沖對(duì)，使其中的弱酸的PKa等于或接近于所要求的pH，例如，生物培養(yǎng)液中需用PH=7.0的緩沖液，已知H2PO4-的pKa2=7.21，因此，H2PO4—HPO42-是可以選擇的合適的緩沖對(duì)。如若配制PH=9.0的緩沖液，則可選擇NH3·H2O-NH4Cl緩沖對(duì)（pKa（NH4+）=9.25）?？梢?jiàn)弱酸的Ka是選擇緩沖液的主要依據(jù)。
　　緩沖液的作用是在有限的范圍內(nèi)調(diào)整溶液的pH值使待測(cè)溶液的酸度符合分析方法所規(guī)定的范圍，例如，苯酚在堿性介質(zhì)及鐵氰化鉀存在下，可與4-氨基安替比林反應(yīng)生成橙紅色的安替比林染料，為了防止芳香胺類的干擾以pH在10士0.2時(shí)較為適宜。為此，就需要在待測(cè)溶液中加入氨一氯化錢緩沖液調(diào)整和控制待測(cè)溶液的pH為10.0士0.2。
　　在實(shí)際工作中有些分析人員由于不大了解緩沖液的作用機(jī)理，當(dāng)所配制和使用的緩沖液與規(guī)定的數(shù)值不相符時(shí)，為使緩沖液達(dá)到要求，就用鹽酸或氫氧化鈉等強(qiáng)酸、強(qiáng)堿進(jìn)行調(diào)節(jié), 以為這樣做可以使緩沖液盡快達(dá)到所需要的pH值，然而，結(jié)果卻適得其反，這樣的溶液pH值雖然調(diào)對(duì)了，可是它的緩沖體系卻被破壞了，作用也就失去了，緩沖液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對(duì)共軛體。